常用滅菌法
1)干熱滅菌法 常見的有火焰、燒灼、干烤和紅外線滅菌等。
①火焰、燒灼:通常用于實驗室無菌操作中金屬或其它耐火材料制成的器具的滅菌。
②干烤和紅外線:利用干熱空氣或熱輻射進行滅菌。一般135~145℃需3~5h,160~170℃需2h以
上,170~180℃需1h以上,180~200℃需0.5~1h。除熱原則需250℃30min,或
200℃45min180℃2h。空氣傳熱慢,穿透力不強,故干熱滅菌時間長。干熱滅菌時烤箱內裝入物
品應留有空隙,以利空氣流動,否則使箱內溫度不均,部分物品滅菌不*。
2)濕熱滅菌法 通過熱蒸汽或沸水使蛋白質變性而殺滅微生物的方法。濕熱穿透
力強,滅菌效果較干熱好。
①煮沸或流通蒸汽滅菌:常壓下沸水和蒸汽的溫度是100℃,一般處理30~60min可殺死細菌繁體,但不能*殺滅芽孢。此法適用于不能高壓蒸汽滅菌的物品。
②低溫間隙滅菌(巴斯德滅菌法):將物品先用60~80℃加熱(或煮沸)1h,然后置20~25℃保
存24h(或常溫過),使其中殘存的芽孢萌發成繁殖體,再用以上條件滅菌,如此反復三次。
本法適用于不耐高溫或高溫下易變質的物品,但很費時。
③高壓蒸汽滅菌(熱壓滅菌法):超過一個大氣壓時,水的沸點高于100℃,反之亦然.高壓蒸
汽滅菌就是通過加壓提高蒸汽溫度,滅菌效果。它簡便、經濟、可靠、無毒,是zui可靠、
應用zui廣泛的滅菌法。此法適用于耐高溫和潮濕的物品。
常用條件為:
115.5℃ 30min
121.5℃ 20min
126.5℃ 15min
注意事項:
a. 必須*排出滅菌器內的空氣。否則會影響滅菌器內溫度達到規定的要求。
b. 注意被滅菌物品的溫度。滅菌器內溫度與被滅菌物品的溫度一般是一致的,但在蒸汽輸入過
快時,后者可能低于前者,所以升溫時要有一定的預熱時間。另外,降溫過快易引起玻璃炸
裂。因此,對于一種滅菌產品應制定一固定的滅菌曲線(象凍干曲線一樣)。
c. 定期檢查滅菌器內溫度的準確性。
3)化學滅菌法 利用化學試劑形成的氣體來殺滅微生物的方法。
常用的滅菌劑為環氧乙烷(又稱氧化乙烯)。環氧乙烷是廣譜殺菌劑,能殺滅細菌、芽孢和多
種病毒,還能殺死昆蟲及蟲卵。但由于環氧乙烷易燃易爆且有毒(有致變異性),用于藥品方
面極有限,多用于醫療器械、塑料制品等滅菌。(不能用于橡膠和乳膠手套,能將其溶解。)
4)濾過除菌法 利用細菌不能通過致密具孔濾材的原理,除去對熱不穩定的藥品溶液或液體
物質中的細菌的方法。過濾法一般只能除菌,不能除去支原體和病毒。過濾除菌的效果與濾膜
的性能、孔徑的大小、密度、濾膜的厚度等因素有關。
濾過除菌法要求zui終過濾的濾膜孔徑為0.22μm。由于各廠家生產的相同規格的濾膜質量并不一
致,為了保證除菌效果,在使用前后應檢查濾器的完好性(如壓力維持試驗或起泡點試驗)。
一個過濾器的使用時間應根據品種驗證后確定,一般不應超過8小時。
5)輻射滅菌法 輻射有兩種類型:一種是電磁波輻射,如紫外線、紅外線、微波;一種是電
離輻射,如可引起被照射物電離的X射線、γ射線。
①紫外線:紫外光波長在136~390nm之間,其中260nm左右能破壞核酸,殺菌作用zui強。另外,
空氣中的氧受紫外線照射后,可微量轉變為臭氧共同起殺菌作用。紫外線消毒的效果與光源的
功率、光源與被照射物的距離、照射時間、溫度和濕度等因素有關。我國規定紫外燈照射強度
在距離1m處不低于70μW/cm2(以紫外線測強儀測定)。在操作面上要求強度達40μW/cm2以
上。一般每10m2裝30W燈管1支,工作前開30~60min。
紫外燈的輸出功率隨使用時間增加而降低。國產紫外燈的平均壽命(點到70%額定功率的時間)
一般為2000h,超過平均壽命時,就達不到預期效果,必須更換。
紫外線的穿透力很弱,不能穿透一般包裝材料,如玻璃、塑料薄膜、紙等。玻璃能強烈吸收小
于350nm的紫外線,石英玻璃能吸收小于200nm的紫外線。因此,它主要用于空氣和物體表面消
毒,特制的紫外燈裝置也可用于水的消毒。紫外線對眼、皮膚有損壞,照射過程中產生的臭氧
對眼、鼻腔有刺激,臭氧過多時使人頭暈、胸悶、血壓下降。
②紅外線:通過加熱碳化硅板產生的輻射熱能,由空氣傳導加熱滅菌。如紅外線烤箱,溫度可
達180℃左右。熱效應特點是由表及里。
③微波:微波滅菌主要是因其熱效應。微波加熱升溫快,溫度高且均勻,殺菌作用強。熱效應
特點是由里及表。不同性質的物品吸收微波的能力不同,其熱效應和消毒效果也不同。微波有
一定穿透力,但不強。微波對人體有害,要注意防護。
④60Co滅菌:放射性同位素60Co(或137Cs)衰變時可放射出γ射線,γ射線的能量高、穿透力
強,可使細胞內各種活性物質發生化學變化,從而使細菌損傷或死亡。
經60Co輻射滅菌的物品溫度升高很少,一般僅約5℃,故又稱“冷滅菌”。60Co輻射存在兩個方
面的安全問題:一是輻射的直接作用。γ射線對人體細胞同樣有害;二是經過輻射的食品、藥
品的安全性。1984年美國農業部食品安全實驗室用輻射處理的雞肉喂飼小鼠,發現患**腫瘤增
加,包括加重癌病損害。因此60Co輻射用于食品和藥品都應經過安全試驗,進行科學的、全面
的評價